① DTT為什麼用酸性條件溶解,鹼性條件發揮還原作用
鹼性條件下,DDT容易分解。
② taq連接酶Buffer中的DTT是什麼作用可以用什麼替代嗎
作用是防止DNA二聚化的,可用巰基乙醇代替,不過代替後可能作用不好。
③ DTT是什麼試劑
DTT即DL-Dithiothreitol,中文名為二硫蘇糖醇。分子式為C4H10O2S2,
常用還原劑,有抗氧化作用
參考:http://ke..com/view/561920.html?wtp=tt
④ DTT 二硫蘇糖醇的作用是什麼啊
DTT 是二硫鍵的還原劑,還可以保持酶中-SH的還原態. 一般來說它影響蛋白的構象,從而對蛋白的活性有影響,如果蛋白分子內無二硫鍵就不會影響結構或活性。但是,有些蛋白(酶)只有在DTT或Cys存在時活性增加。
⑤ DTT的作用是什麼,它對蛋白有哪些影響
DTT的作用是DTT可用於阻止蛋白質中的半胱氨酸之間所形成的蛋白質分子內或分子間二硫鍵。DTT對蛋白的影響是DTT也可以對蛋白質中二硫鍵進行還原。
DTT是DL-Dithiothreitol的縮寫,中文名為二硫蘇糖醇。DTT往往無法還原包埋於蛋白質結構內部的二硫鍵,這類二硫鍵的還原常常需要先將蛋白質變性。反之,根據DTT存在情況下,二硫鍵還原速度的不同,可以判斷其包埋程度的深淺。
(5)dtt的作用擴展閱讀:
由於容易被空氣氧化,因此DTT的穩定性較差;但冷凍保存或在惰性氣體中處理能夠延長它的使用壽命。
由於質子化的硫的親核性較低,隨著pH值的降低,DTT的有效還原性也隨之降低。Trisphosphine HCl可以作為低pH值條件下DTT的替代品,而且也比DTT更為穩定。
⑥ DTT作用是什麼DTT的作用是什麼
DTT為常用還原劑,
有抗氧化作用.它能保護酶分子上的還原性基團,
維持還原性環境,穩定酶的活性.
⑦ DTT用來保護蛋白的終濃度是什麼
因為有些蛋白有半胱氨酸的存在,所以會形成很多-SH鍵來維持蛋白質的高級結構又因為-SH鍵具有很強的還原性,為了避免-SH被氧化而造成蛋白失去活性,所以需要加入DTT來保護-SH鍵不被還原掉。但是DTT量太高的話又會破壞掉二硫鍵。也就是說DTT濃度太低起不到保護作用,濃度太高又會破壞結構。所以如果一些蛋白需要添加的話一般是建議在0.5mM~1.5mM之間。
以摩爾數計算,5-10倍的量來保護-SH。如果蛋白報存buffer中含有15%左右的甘油,對蛋白具有很好的穩定作用。補充一點:如果dtt和蛋白摩爾比例比例增大到1:100,DTT就能破壞2硫鍵了,這時對應的濃度一般在10mM左右。
⑧ DTT是否既能激活一些酶又能使一些酶失活,為什麼
二硫蘇糖醇(Dithiothreitol,簡稱為DTT)
CAS號 3483-12-3
PubChem 446094
SMILES SC[C@@H](O)[C@H](O)CS
DTT是一種小分子有機還原劑。其還原狀態下為線性分子,被氧化後變為包含二硫鍵的六元環狀結構。二硫蘇糖醇的名字衍生自蘇糖(一種四碳單糖)。DTT的異構體為Dithioerythritol(DTE),即DTT的氧化結構。
DTT是一種很強的還原劑,其還原性很大程度上是由於其氧化狀態六元環(含二硫鍵)的構象穩定性。它的氧化還原電勢在pH為7時為-0.33伏。二硫蘇糖醇對一個典型的二硫鍵的還原是由兩步連續的巰基-二硫鍵交換反應所組成。
其中,第一步反應所形成的中間態很不穩定,因為DTT上的第二個巰基趨向於與被氧化的硫原子連接,使中間態很快被轉化為DTT的環狀氧化結構,從而完成對二硫鍵的還原。
DTT的還原力受pH值的影響,只在pH值大於7的情況下能夠發揮還原作用。這是因為只有脫去質子的硫醇鹽負離子(-S–)才具有反應活性,硫醇(-SH)則沒有;而巰基的pKa一般為~8.3。
DTT的用途之一是作為巰基化DNA的還原劑和去保護劑。巰基化DNA末端硫原子在溶液中趨向於形成二聚體,特別是在存在氧氣的情況下。這種二聚化大大降低了一些偶聯反應實驗(如DNA在生物感應器中的固定)的效率;而在DNA溶液中加入DTT,反應一段時間後除去,就可以降低DNA的二聚化。
DTT也常常被用於蛋白質中二硫鍵的還原,可用於阻止蛋白質中的半胱氨酸之間所形成的蛋白質分子內或分子間二硫鍵(能夠保護正常晶體蛋白所含的半胱氨酸等成分不受氧化修飾,減少其變性可能性)。但DTT往往無法還原包埋於蛋白質結構內部(溶劑不可及)的二硫鍵,這類二硫鍵的還原常常需要先將蛋白質變性(高溫加熱或加入變性劑,如6M 鹽酸胍、8M 尿素或1% SDS)。反之,根據DTT存在情況下,二硫鍵還原速度的不同,可以判斷其包埋程度的深淺。
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巰基保護試劑如DTT、巰基乙醇對酶活力有顯著的激活作用,但是同時DTT可以逆轉激活作用,因為它同時也是蛋白質變性劑,破壞二硫鍵。變性目的蛋白,破壞二硫鍵能幫助打開蛋白質的二硫鍵,使待分析的蛋白質分離成為單一的蛋白亞基。DTT是一種硫醇還原劑,當其濃度達到50mM時可促進大多數蛋白的半胱氨酸殘基被還原。
⑨ DTT作用是什麼
DTT作用如下:
1、DTT的作用之一是作為巰基化DNA的還原劑和去保護劑。巰基化DNA末端硫原子在溶液中趨向於形成二聚體,特別是在存在氧氣的情況下。這種二聚化大大降低了一些偶聯反應實驗(如DNA在生物感應器中的固定)的效率;而在DNA溶液中加入DTT,反應一段時間後除去,就可以降低DNA的二聚化。
2、DTT也常常被用於蛋白質中二硫鍵的還原,可用於阻止蛋白質中的半胱氨酸之間所形成的蛋白質分子內或分子間二硫鍵。但DTT往往無法還原包埋於蛋白質結構內部(溶劑不可及)的二硫鍵,這類二硫鍵的還原常常需要先將蛋白質變性(高溫加熱或加入變性劑,如6M鹽酸胍、8M尿素或1%SDS)。反之,根據DTT存在情況下,二硫鍵還原速度的不同,可以判斷其包埋程度的深淺。
DTT即DL-Dithiothreitol,中文名為二硫蘇糖醇。分子式為C4H10O2S2,分子量為154.25,純度>99%。常用還原劑,有抗氧化作用,進口分裝。DTT和巰基乙醇相比,作用相似,但DTT的刺激性氣味要小很多,毒性也比巰基乙醇低很多。而且DTT比巰基乙醇的濃度低7倍時,兩者效果相近,但DTT價格略高一些。