A. 9个Western Blot工具，帮你搞定实验最关键的一步！
在进行Western Blot实验时，以下九个工具能帮助你轻松查询和获取关键信息，确保实验的顺利进行：
BioGPS：
- 功能：提供基因在不同细胞和组织中的表达数据。
- 用途：通过搜索目标基因，可以观察到该基因在不同条件下的表达情况，有助于实验设计。
The Human Protein Atlas：
- 功能：展示人类蛋白质在细胞、正常组织和肿瘤组织中的分布。
- 用途：了解目标蛋白质在细胞和组织中的具体位置，有助于预测实验结果。
PhosphoSitePlus：
- 功能：查找翻译后修饰信息，包括磷酸化、甲基化等。
- 用途：了解目标蛋白质的修饰情况，有助于解释实验结果中的异常表达。
Uniprot：
- 功能：提供基因名、功能、可变剪切体和翻译后修饰情况等详细信息。
- 用途：全面了解目标蛋白质的基本信息，为实验设计和结果分析提供基础。
Expasy：
- 功能：提供蛋白质序列、构造及2D PAGE资料。
- 用途：分析蛋白质的序列和结构，有助于预测蛋白质的性质和行为。
NCBI：
- 功能：通过gene查询功能获取基因信息、表达分布等详细数据。
- 用途：了解目标基因的基本信息和表达情况，为实验设计提供依据。
Openi：
- 功能：搜索和检索生物医学图像，如免疫组化、免疫印迹等实验结果图。
- 用途：参考其他实验的结果图像，有助于预测和解释自己的实验结果。
PMC Images：
- 功能：美国国立卫生研究院的图片数据库，搜索与论文相关的图像。
- 用途：获取与实验相关的专业图像，为实验结果的解读提供参考。
citeab：
- 功能：一站式抗体搜索引擎，根据抗体引用次数推荐质量可靠的产品。
- 用途：选择高质量的抗体产品，确保实验结果的准确性和可靠性。
这些工具能够帮助你全面了解目标蛋白质的信息，从而确保Western Blot实验的顺利进行和结果的准确解读。
B. WB的无敌战神之路——WB的内参选择
在你的WB探索之旅中，成为无敌战神的关键在于明智的内参选择。让我们深入解析这个关键步骤，提升你的实验成功率。首先，理解什么是内参——它就像实验中的稳定罗盘，帮助校准误差并监控整个蛋白表达系统。GAPDH、Tubulin和Actin是你的内参好友，各有其特性：GAPDH作为糖酵解酶，稳定但易受条件影响，Tubulin适合微管结构研究，而Actin分布广泛，但某些组织中表达可能较低。
选择内参时，要考虑目标蛋白的定位、分子量，以及实验条件。例如，如果你在研究蛋白质修饰（PTM），记得选用未修饰的目标蛋白作为对照，确保结果的准确性。收藏这篇文章，让你的实验无惧挑战。
对照选择同样重要，如STAT3与Actin的配合，研究组蛋白位点时，要选用相应的组蛋白内参。考虑实验覆盖的组织类型，以及物种间的差异，比如Actin在不同组织中的表达差异不容忽视，基因型因素也不能忽视。推荐使用CiteAb精选的"PTM-6558"小样套装，包含4种前沿抗体，让你的实验更具效率。
当然，省钱的方法也值得尝试。如植物Rubisco（丽春红染色）和全蛋白（考马斯染色）可以作为低成本内参。在使用内参时，要区分直标抗体（需要高表达）和普通抗体，以满足不同检测需求。关键在于精准定量、保持内参稳定性，以及微调样本加载量和线性浓度范围，理想情况下，蛋白样本5-10 μg，内参5 μg是个不错的选择。
接下来的图2至图8，每一张都是你内参选择道路上的指引，它们详细展示了不同条件下的最佳实践和策略。每一步都至关重要，记住，一个明智的内参策略，就像一把无形的利剑，助力你在这场无敌战神的竞赛中取得胜利。现在，就踏上你的WB无敌之路吧！