『壹』 动物细胞培养的基本过程
一、准备工作
准备工作对开展细胞培养异常重要，工作量也较大，应给予足够的重视，准备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒，培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌，无菌室或超净台的清洁与消毒，培养箱及其他仪器的检查与调试。
二、取材
在无菌环境下从机体取出某种组织细胞（视实验目的而定），经过一定的处理（如消化分散细胞、分离等）后接入培养器皿中，这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的首次培养称为原代培养。
理论上讲各种动物和人体内的所有组织都可以用于培养，实际上幼体组织（尤其是胚胎组织）比成年个体的组织容易培养，分化程度低的组织比分化高的容易培养，肿瘤组织比正常组织容易培养。
取材后应立即处理，尽快培养，因故不能马上培养时，可将组织块切成黄豆般大的小块，置4℃的培养液中保存。取组织时应严格保持无菌，同时也要避免接触其他的有害物质。取病理组织和皮肤及消化道上皮细胞时容易带菌，为减少污染可用抗菌素处理。
三、培养
将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。如系组织块培养，则直接将组织块接入培养器皿底部，几个小时后组织块可贴牢在底部，再加入培养基。如系细胞培养，一般应在接入培养器皿之前进行细胞计数，按要求以一定的量（以每毫升细胞数表示）接入培养器皿并直接加入培养基。细胞进入培养器皿后，立即放入培养箱中，使细胞尽早进入生长状态。
正在培养中的细胞应每隔一定时间观察一次，观察的内容包括细胞是否生长良好，形态是否正常，有无污染，培养基的PH是否太酸或太碱（由酚红指示剂指示），此外对培养温度和CO2浓度也要定时检查。一般原代培养进入培养后有一段潜伏期（数小时到数十天不等），在潜伏期细胞一般不分裂，但可贴壁和游走。过了潜伏期后细胞进入旺盛的分裂生长期。
细胞长满瓶底后要进行传代培养，将一瓶中的细胞消化悬浮后分至两到三瓶继续培养。每传代一次称为“一代”。二倍体细胞一般只能传几十代，而转化细胞系或细胞株则可无限地传代下去。转化细胞可能具有恶性性质，也可能仅有不死性（Immortality）而无恶性。培养正在生长中的细胞是进行各种生物医学实验的良好材料。
四、冻存及复苏
为了保存细胞，特别是不易获得的突变型细胞或细胞株，要将细胞冻存。冻存的温度一般用液氮的温度—－196℃，将细胞收集至冻存管中加入含保护剂（一般为二甲亚砜或甘油）的培养基，以一定的冷却速度冻存，最终保存于液氮中。
在极低的温度下，细胞保存的时间几乎是无限的。复苏一般采用快融方法，即从液氮中取出冻存管后，立即放入37℃水中，使之在一分钟内迅速融解。然后将细胞转入培养器皿中进行培养。冻存过程中保护剂的选用、细胞密度、降温速度及复苏时温度、融化速度等都对细胞活力有影响。
(1)细胞培养视频扩展阅读：
进入细胞间开始细胞培养时，注意事项：
①确定所有的细胞操作用的溶液和耗材都已经消毒并检测没有问题，不确定的溶液和耗材请勿使用，除非特殊情况，不要借用别人的溶液。
②确定衣服的袖口已经卷起或者白大褂的袖口已经扎紧。
③确定酒精灯内的酒精量，需要的话及时进行补充。
④确定所有需要用到的溶液和耗材都放在伸手可及的位置。为了方便单手开启瓶盖，实验开始前可以把所有瓶盖旋松。
⑤尽量不要直接倾倒溶液，除非瓶口没有被烧坏。如果倾倒失败，溶液粘在瓶口，请用喷过75%酒精的纸巾仔细清洁瓶口周围（不要接触到瓶口）后在火焰上简单烧灼。
⑥操作时如果不能肯定所用的耗材是洁净的，必须及时更换。
⑦实验完毕及时收拾，保持工作区域清洁整齐，最后用75%酒精清洁台面。
『贰』 谁有细胞培养的视频
你可以直接搜索，细胞培养的视频，网络里面有很多。
『叁』 买了个诺基亚C6 放进去的视频文件 结果"视频"这个程序里没有 怎么回事(请看完详细内容!!!)
脑其实就是用GHOST软件将已装好系统的文件做一个硬盘镜像，下次装机时，只要将硬盘镜像文件恢复即可完成硬盘数据的恢复，它的特点是安装迅速，比传统的经硬盘分区-格式化-SETUP安装系统-安装软件要节约很多时间。不足之处是，因每台机器的配置不可能完全相同，故除非是配置完全相同的机器一般首次装系统时不建议全用GHOST来安装。但首次系统和软件安装完毕后可用GHOST制作硬盘或分区镜像，这样当系统崩溃需要重装时可用GHOST快速恢复。 克隆，就是利用SHOST这个软件把一个电脑上安装好的系统“复制”到别一个电脑上（电脑配置要完全一致）。你说的恢复：首先要用GHOST这个软件做个备份，才能在系统出现问题时恢复。 克隆是一个形象的比喻 他是使用一张GHO的系统盘 不用进行安装把盘以同样分区的形式COPY到你的硬盘上 这样能大大减少安装时间 一班是2分钟安装完系统 恢复使用GHOST就可以了 克隆操作是星际中的操作，魔兽中不怎么用克隆操作的。举个简单的例子吧，星际中的克隆操作，例如你要用一队虫族的自杀机去撞神族的三个航母，那么需要4个去撞一个（我不知道4个能否撞掉一个航母，不太懂，只是例子），你先选那一队自杀机去撞一个航母，然后按住SHIFT键从编队中迅速的踢出4个自杀机，剩下的8个去撞另一个航母，然后接着踢出4个，剩下的4个去撞第三个航母，这就是一个克隆操作。魔兽中没有必要，如果你想用兽族的自爆蝙蝠去撞对手的空军，只要选中蝙蝠的编队不停的点C键然后点在对手的空军上就行了。操作比较方便。 1.1 克隆概念克隆是英文clone的音译，简单讲就是一种人工诱导的无性繁殖方式。克隆并不是一个新的概念，克隆(cloning)这个词源于希腊语中clonos，意为"twig"，即嫩枝。在生物的分子、细胞、个体三个不同层次上，"克隆"有不同的含义。在分子水平上，用分子生物学技术利用细菌或病毒使原来某一片段DNA形成一群DNA分子的过程，叫做分子克隆或DNA克隆，而且相同的分子叫一个克隆。在生物学中，细胞克隆技术的正规名词为细胞培养技术，通过细胞培养得到大量的细胞或其代谢产物。在自然界指人工培育克隆体(DNA分子、微生物、植物、动物)这一操作过程。核移植是指利用显微外科手术的方法将胚胎细胞或成体细胞的细胞核移人去核的卵母细胞中，构建成重组胚，通过体内或体外培养、胚胎移植，产生与供体细胞基因型相同的后代的技术过程，又称为动物克隆技术。根据核供体的来源不同，可将其分为胚胎细胞克隆动物和体细胞克隆动物技术。1.2 克隆研究的主要内容克隆技术是一个复杂的技术体系，是多种技术的综合，涵盖了生命复制的全过程。它既包括某些基础研究又包括了许多技术操作细节。动物克隆的过程，实际上是把一个供体核和去核的卵细胞融合成一个新的胚胎，在人工条件下使它发育，再移植到母体动物，进而得到一个完全和核供体相同的动物个体的过程。主要内容包括：1.2.1 供核细胞的来源和特性1.2.2 细胞质受体的来源和特性1.2.3 重构胚核质适应机理1.2.4 克隆技术支持体系研究1.2.5 重构胚胎体内和体外培养技术1.2.6 克隆技术实用化研究1.3 转基因克隆动物技术动物克隆技术属于无性繁殖范畴，能实现基因型复制，使少数优秀个体迅速扩大成群。转基因克隆技术是转基因技术和动物克隆技术的有机结合，其研究意义和实用价值又超过了两种技术。它以转基因细胞为核供体，采用体细胞核移植技术产生转基因克隆动物，实现种质创新。转基因克隆动物技术显示出现的优势主要表现在：一是生产效率高；二是周期短，成本低；三是可以决定后代性别。但克隆与无性繁殖是不同的。无性繁殖是指不经过雌雄两性生殖细胞的结合、只由一个生物体产生后代的生殖方式，常见的有孢子生殖、出芽生殖和分裂生殖。由植物的根、茎、叶等经过压条或嫁接等方式产生新个体也叫无性繁殖。绵羊、猴子和牛等动物没有人工操作是不能进行无性繁殖的。科学家把人工遗传操作动物繁殖的过程叫克隆，这门生物技术叫克隆技术。克隆的基本过程是先将含有遗传物质的供体细胞的核移植到去除了细胞核的卵细胞中，利用微电流刺激等使两者融合为一体，然后促使这一新细胞分裂繁殖发育成胚胎，当胚胎发育到一定程度后，再被植入动物<br>网上也有解决这个问题的视频操作演示<br>你网络搜索“龙云手机网”就可以了<br>按照网上的视频教你来操作，就可以顺利解决，因为<br>视频里有很详细的介绍。关于“手机手机诺基亚N97老是死机”的
『肆』 细胞培养的具体步骤和要求以及注意事项
一、细胞复苏
将冻存细胞从液氮中取出后，在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移人15ml离心管中，加入10ml预热的DMEM完全培养基，轻轻吹匀，离心，2000rpmX2min，弃上清液。
加入10ml DMEM培养基清洗，弃上清液。加入10ml DMEM完全培养基，轻轻吹打，接种于10cm盘中，在含5%CO2的细胞培养箱中培养。
二、细胞传代
细胞密度达到80%~90%时．去培养基，10ml PBS清洗2次。加入3ml含0．25%EDTA的胰蛋白酶，放人细胞培养箱3min。加人1ml DMEM完全培养基终止胰酶消化，转移至15ml离心管。
加入10ml PBS清洗细胞培养盘，转移至15ml离心管，2000rpmX2min，弃上清液。再加入10ml PBS（经高压灭菌，保存于40C），吹匀，吸取10微升进行计数，按照1×106/盘接种，在含5%CO2的细胞培养箱继续培养。
三、细胞冻存
细胞密度达到80%～90%时，去培养基，10ml PBS清洗2次。加入3ml含0.25%EDTA的胰蛋白酶，放人细胞培养箱3min。加入lmlDMEM完全培养基终止胰酶消化，转移至15ml离心管。加入10ml PBS清洗细胞培养盘，转移至15ml离心管，2000rpmX2min，弃上清液。
加入lml冻存液（90%血清，10%DMSO），放入冻存盒内（盒内有异丙醇，以保证温度降低的速度），立即放入一80℃冰箱内，过夜，第二天放入液氮中，可以保存至少两年，如不放人液氮，可以保存三个月。
冻存液的配制：70%的完全培养基+20%FBS+10%DMSO.DMSO要慢慢滴加，边滴边摇。
注意事项
（1）进入细胞间开始细胞培养时，必须严格按照下列步骤操作：
①确定所有的细胞操作用的溶液和耗材都已经消毒并检测没有问题，不确定的溶液和耗材请勿使用，除非特殊情况，不要借用别人的溶液。
②确定衣服的袖口已经卷起或者白大褂的袖口已经扎紧。
③确定酒精灯内的酒精量，需要的话及时进行补充。
④确定所有需要用到的溶液和耗材都放在伸手可及的位置。为了方便单手开启瓶盖，实验开始前可以把所有瓶盖旋松。
⑤尽量不要直接倾倒溶液，除非瓶口没有被烧坏。如果倾倒失败，溶液粘在瓶口，请用喷过75%酒精的纸巾仔细清洁瓶口周围（不要接触到瓶口）后在火焰上简单烧灼。
⑥操作时如果不能肯定所用的耗材是洁净的，必须及时更换。
⑦实验完毕及时收拾，保持工作区域清洁整齐，最后用75%酒精清洁台面。
（2）细胞污染的预防
①实验用品防止污染。细胞培养所用试剂、耗材、器材的清洗、消毒要彻底，各种溶液灭菌要仔细，并在无菌实验检测阴性后才能使用。操作室及剩余的无菌器材要定期清洁、消毒、灭菌。
②操作过程防止污染。
③穿着容易起静电或吸附灰尘的衣物必须更换为白大褂后才能进入细胞间。
④实验开始前需要确定戴的手套没有问题，只要接触过生物安全柜之外的物品，必须及时对手套进行消毒。
⑤进入细胞培养间后关好门，坐下来尽量少走动以免影响生物安全柜的风帘。工作开始前要先用75%酒精棉球擦手和瓶盖。事先要严格检查所用的器材、溶液和细胞，不要把污染品或未经消毒的物品带入无菌室内，更不能随便使用，以免造成大规模污染。
⑥细胞操作时动作要轻，必须在火焰周围无菌区内打开瓶口，并将瓶口放在火焰周围简单转动烧灼，注意不要让火焰把塑料瓶口烧化。
⑦实验操作时生物安全柜的隔板要尽可能放低，尽量减少谈话，打喷嚏或咳嗽时绝对不能对着工作区，以免造成不必要的污染。
⑧瓶盖应当倒放在远离自己的地方，以避免瓶盖被误操作所污染。
⑨不要从敞开的容器口上方经过，以避免衣服上掉落不明物体对细胞的污染。
⑩实验操作时要注意及时更换巴斯德吸管、移液枪枪头和移液管，切勿一根管子做到底。一旦发现接触了非洁净或者无法确定洁净的物品必须直接丢弃。实验完毕应及时收拾，保持实验室清洁整齐，最后用75%酒精清洁台面。
（3）防止细胞交叉污染
①在进行多种细胞培养操作时，所用器具要严格区分，最好作上标记便于辨别。按顺序进行操作，一次只处理一种细胞，多种细胞多种操作一起进行时易发生t昆乱。
②在进行换液或传代操作时，粘有细胞的移液枪头和移液管不要触及试剂瓶瓶口，以免把细胞带到培养基中污染其他细胞。
③所有细胞一旦购置，或从别处引入，或自己建立，必须及时保种冻存，一旦发生污染可重新复苏细胞，继续培养。
(4)细胞培养视频扩展阅读：
细胞培养（cell culture）是指在体外模拟体内环境（无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等），使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。细胞培养也叫细胞克隆技术，在生物学中的正规名词为细胞培养技术。
不论对于整个生物工程技术，还是其中之一的生物克隆技术来说，细胞培养都是一个必不可少的过程，细胞培养本身就是细胞的大规模克隆。细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞，这是克隆技术必不可少的环节，而且细胞培养本身就是细胞的克隆。
细胞培养技术是细胞生物学研究方法中重要和常用技术，通过细胞培养既可以获得大量细胞，又可以借此研究细胞的信号转导、细胞的合成代谢、细胞的生长增殖等。
『伍』 传代细胞的培养步骤
1、附着型胞(adherentcell)
（1）吸掉旧培养液。
（2）用D-PBS洗涤细胞一至二次。
（3）加入trypsin-EDTA溶液(1ml/25cm2,2ml/75cm2)，37℃作用数分钟，于倒立显微镜下观察，当细胞将要分离而呈现圆粒状时，吸掉trypsin-EDTA溶液。(若不移去trypsin-EDTA，则在trypsin-EDTA作用后，加入适量含血清之新鲜培养基终止trypsin作用，离心后再吸掉上清液。
（4）轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落，加入适量之新鲜培养基，以吸管上下吸放数次以打散细胞团块，混和均匀后，依稀释比例转移至新的培养瓶中，以正常培养条件培养。
2、悬浮型细胞(suspensioncell)
（1）吸出细胞培养液，放入离心管中，离心1000rpm5分钟。
（2）吸掉上清液，加入适量之新鲜培养基，混和均匀后，依稀释比例转移至新的培养瓶中，以正常培养条件培养。
3、融合瘤(hybridoma)
有些hybridomacell需培养三天以上才会产生抗体，若是更换培养基，则可能会失去抗体。因此继代培养不需离心后更换培养基，直接添加新鲜培养基稀释细胞浓度即可。若体积太大，可倾斜放置，或分殖至新培养瓶中。
(5)细胞培养视频扩展阅读：
传代方法：
1、悬浮生长细胞传代
多采用离心法传代。1000转/分,20-30秒后去上清。沉淀细胞加新培养液后再混匀传代。亦有直接传代 法，即悬浮细胞沉淀在瓶壁时，将上清培养液去除1/2-1/3，然后用吸管直接吹打形成细胞悬液再传代.
2、半悬浮生长细胞传代（Hela细胞）
此类细胞部分呈现贴壁生长现象，但贴壁不牢，可用直接吹打法使细胞从瓶壁脱落下来，进行传代。
3、贴壁生长细胞传代
采用酶消化法传代。常用的消化液有0.25%的胰蛋白酶液。
『陆』 高中生物细胞工程技术
细胞工程又分为植物细胞工程和动物细胞工程。高中课本上对细胞工程的解释：指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过细胞水平或细胞器水平上的操作，按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。
1。植物细胞工程的基本技术有植物组织培养技术，植物体细胞杂交技术（这中间还有很多学问，我就先粗略回答一下）
植物组织培养技术就是用植物身上任何一部分（其实也并不是任何一部分，一般为了提高成功率，都会选择分化程度较低的植物细胞，如胚胎干细胞，卵子精子的分化程度就较低，植物的体细胞如叶肉细胞，保卫细胞等这种分化程度较高，一般不易培养。）经过认为培养使其生长成为完整的植株。
植物体细胞杂交技术就是将两种植物细胞通过一定的物理或化学方法融合（需要先去掉植物细胞的细胞壁，利用生物膜的流动性即可融合），使杂交细胞同时具有融合前两种细胞的共同有点，比如人们就将番茄细胞和马铃薯细胞融合，希望通过杂交细胞培养出来的新植株上部结番茄，地下长马铃薯（但好像因为基因的选择性表达，目前虽然有这种植株，但它并没有又结马铃薯又结番）。
2。动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养，动物细胞核移植，动物细胞融合，生产单克隆抗体，其中动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。
动物细胞培养就如其名，人工将动物细胞分散并培养。应用有研制病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等，基因工程中将目的基因载入受体细胞后也许细胞培养，培养动物细胞还可以用来监测有毒物质，或研究病变细胞，为疾病提供理论依据。
动物细胞核移植内容也如其名，就是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎将发育为新的个体。用核移植方法得到的动物称为克隆动物。哺乳动物核移植可分为胚胎细胞核移植，体细胞核移植（具体过程不做详解了，有兴趣可以再问）。
动物细胞融合也是用一定的物理或化学方法将两个或多个动物细胞结合形成一个细胞。
生产单克隆抗体需要用到动物细胞培养和动物细胞融合着两个技术，要想详细了解的话网络知道上有，还是我答的哦。
『柒』 求视频:RAW264.7细胞的培养 视频
不一定非要看RAW264.7细胞的培养，可以看看其他动物细胞培养作为参照。在网络视频直接搜动物细胞培养就行。主要还是自己养的时候自己摸索，看你的细胞到底怎样生长状态好。祝你好运！
『捌』 动物细胞培养过程要注意什么
自己看吧。
一、复苏
1.把冻存管从液氮中取出来，立即投入37℃水浴锅中，轻微摇动。液体都融化后（大概1-1.5分钟），拿出来喷点酒精放到超净工作台里。
2.把上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中（用培养基把冻存管洗一遍，把粘在壁上的细胞都洗下来），1000转离心5分钟。
3.把上清液倒掉，加1ml培养基把细胞悬浮起来。吸到装有10ml培养基的10cm培养皿中前后左右轻轻摇动，使培养皿中的细胞均匀分布。
4.标好细胞种类和日期、培养人名字等，放到CO2培养箱中培养，细胞贴壁后换培养基。
5.3天换一次培养基。
二、传代
1.培养皿中的细胞覆盖率达到80%-90%时要传代。
2.把原有培养基吸掉。
3.加适当的胰蛋白酶（能覆盖细胞就行），消化1-2分钟。
4.细胞都变圆后加如入等体积的含血清的培养基终止消化。
5.用移液枪吹打细胞，把细胞都悬浮起来。
6.把细胞吸到15ml的离心管中，1000转离心5分钟。
7.倒掉上清液，加1-2ml培养基，把细胞都吹起来。
8.根据细胞种类把细胞传到几个培养皿中。一般，癌细胞分5个，正常细胞传3个。继续培养。
三、 冻存
把细胞消化下来并离心（同上）。用配好的冻存液把细胞悬浮起来，分装到灭菌的冻存管中，静止几分钟，写明细胞种类，冻存日期。4℃ 30min，-20℃ 30min，-80℃过夜，然后放到液氮灌中保存。
冻存液的配制： 70%的完全培养基 20%DMSO. DMSO要慢慢滴加，边滴边摇。
要注意的就是无菌操作！
『玖』 动物细胞培养的注意事项
原代动物细胞培养：
1、实验材料要新鲜，从活体分离材料后要低温保存，并尽快进行细胞分离实验。
2、无菌操作。操作时用的培养液，可加平时细胞培养液5倍含量的青链霉素。
3、用酶法分离细胞时，注意酶液的浓度和控制消化时间。
贴块法分离细胞时，注意动作要轻柔，不要伤到细胞组织，组织块边缘尽量平整有利于细胞游离。
4、培养液的选择。不同的细胞有对培养液中营养的要求不同，根据所分离细胞的特性选择。
传代细胞培养：
1、无菌操作
2、控制消化时间
3、及时关注细胞生长状态
『拾』 请问哪里可以下载到细胞培养的视频教程急
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