❶ 單克隆抗體是什麼意思
單克隆抗體意思
定義1:高度均質性的特異性抗體,由一個識別單一抗原表位的B細胞克隆所分泌。一般來自雜交瘤細胞。 定義2:只識別一種表位(抗原決定簇)的抗體,來自單個B淋巴細胞的克隆或一個雜交瘤細胞的克隆。
❷ 什麼是單克隆抗體 作用是什麼
本質是雜交瘤細胞。用瘤細胞與具有免疫效應的效應B細胞融合,即成為單克隆抗體。它不僅能具有免疫效應,也可以無限增殖。補充前面兄弟所說的效應T系胞不能分秘抗體。
❸ 什麼叫單克隆抗體,有何意義
單克隆抗體(以下簡稱單抗)葯物是抗體類葯物中最重要的一類。按照人源化程度的不同,單抗葯物可以分為鼠源單抗、嵌合單抗、人源化單抗和全人源單抗:
1>鼠源單抗:為早期的單抗葯物,由於其為異源蛋白,因此在人體中具有免疫原性,易引發人體的抗鼠單抗免疫反應。綜合來看,因鼠源單抗副作用大、半衰期短且葯效較差,迄今為止,FDA 僅僅批准過 3 個鼠源單抗。
2>嵌合單抗:為了提高抗體的人源化程度,人們開發了嵌合抗體技術生產嵌合抗體。嵌合抗體是指用人抗體的恆定區取代小鼠的恆定區,保留鼠抗體的可變區序列,形成人鼠嵌合的抗體。嵌合抗體相比鼠單抗,免疫原性大幅下降,因此副作用降低,半衰期加長,但是由於嵌合抗體仍保留了 30%左右的鼠源序列,還是會引起一定程度的免疫反應。
3>人源化單抗:為了進一步降低抗體的鼠源性,人們又開發了重構抗體技術生產重構人源化抗體。重構抗體就是互補決定區(CDR)移植技術,即將鼠抗體的 CDR 移植到人抗體的骨架區,這樣制備得到的抗體人源化程度可達 90%以上,稱為人源化抗體。
4>全人源化單抗:全人源化單抗是 100%人源性抗體,它是用於人類疾病治療的理想抗體,目前它主要通過噬菌體展示技術和轉基因小鼠技術制備。第一個全人源單抗葯物就是大名鼎鼎的修美樂,它就是利用噬菌體展示技術研發成功的,適用於類風濕性關節炎等自身免疫疾病的治療,2002 年上市,目前已經連續 6 年蟬聯全球葯品銷售額榜首。
❹ 單抗是什麼
動物脾臟有上百萬種不同的B淋巴細胞系,具有不同基因的B淋巴細胞合成不同的抗體。當機體受抗原刺激時,抗原分子上的許多決定簇分別激活各個具有不同基因的B細胞。被激活的B細胞分裂增殖形成效應B細胞(漿細胞)和記憶B細胞,大量的漿細胞克隆合成和分泌大量的抗體分子分布到血液、體液中。如果能選出一個製造一種專一抗體的漿細胞進行培養,就可得到由單細胞經分裂增殖而形成細胞群,即單克隆。單克隆細胞將合成針對一種抗原決定簇的抗體,稱為單克隆抗體。
簡介
1975年分子生物學家G.J.F.克勒和C.米爾斯坦在自然雜交技術的基礎上,創建立雜交瘤技術,他們把可在體外培養和大量增殖的小鼠骨髓瘤細胞與經抗原免疫後的純系小鼠脾細胞融合,成為雜交細胞系,既具有瘤細胞易於在體外無限增殖的特性,又具有抗體形成細胞的合成和分泌特異性抗體的特點。將這種雜交瘤作單個細胞培養,可形成單細胞系,即單克隆。利用培養或小鼠腹腔接種的方法,便能得到大量的、高濃度的、非常均一的抗體,其結構、氨基酸順序、特異性等都是一致的,而且在培養過程中,只要沒有變異,不同時間所分泌的抗體都能保持同樣的結構與機能。這種單克隆抗體是用其他方法所不能得到的。
這項新技術從根本上解決了在抗體制備中長期存在的特異性和可重復性問題,可用於探討①蛋白質的精細結構;②淋巴細胞亞群的表面新抗原;③組織相容性抗原;④激素和葯物的放射免疫(或酶免疫)分析;⑤腫瘤的定位和分類;⑥純化微生物和寄生蟲抗原;⑦免疫治療和與葯物結合的免疫-化學療法 (「導彈」療法,利用單克隆抗體與靶細胞特異性結合,將葯物帶至病灶部位。因此,單克隆抗體可直接用於人類疾病的診斷、預防、治療以及免疫機制的研究,為人類惡性腫瘤的免疫診斷與免疫治療開辟了廣闊前景。
2制備過程
1、免疫動物 免疫動物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠產生致敏B淋巴細胞的 過程。 一般選用6-8周齡雌性Balb/c小鼠,按照預先制定的免疫方案進行免疫注射。 抗原通過血液循環或淋巴循環進入外周免疫器官,刺激相應B淋巴細胞克隆,使其活化、增殖,並分化成為致敏B淋巴細胞。
2、細胞融合 採用眼球摘除放血法處死小鼠,無菌操作取出脾臟,在平皿內擠壓研磨,制備脾細胞懸液。 將准備好的同系骨髓瘤細胞與小鼠脾細胞按一定比例混合,並加入促融合劑聚乙二醇。在聚乙二醇作用下,各種淋巴細胞可與骨髓瘤細胞發生融合,形成雜交瘤細胞。
3、選擇性培養 選擇性培養的目的是篩選融合的雜交瘤細胞,一般採用HAT選擇性培養基。在HAT培養基中,未融合的骨髓瘤細胞因缺乏次黃嘌呤-鳥嘌呤-磷酸核糖轉移酶,不能利用補救途徑合成DNA而死亡。 未融合的淋巴細胞雖具有次黃嘌呤-鳥嘌呤-磷酸核糖轉移酶,但其本身不能在體外長期存活也逐漸死亡。 只有融合的雜交瘤細胞由於從脾細胞獲得了次黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉移酶,並具有骨髓瘤細胞能無限增殖的特性,因此能在HAT培養基中存活和增殖。
4、雜交瘤陽性克隆的篩選與克隆化 在HAT培養基中生長的雜交瘤細胞,只有少數是分泌預定特異性單克隆抗體的細胞,因此,必須進行篩選和克隆化。通常採用有限稀釋法進行雜交瘤細胞的克隆化培養。採用靈敏、快速、特異的免疫學方法,篩選出能產生所需單克隆抗體的陽性雜交瘤細胞,並進行克隆擴增。經過全面鑒定其所分泌單克隆抗體的免疫球蛋白類型、亞類、特異性、親和力、識別抗原的表位及其分子量後,及時進行凍存。
5、單克隆抗體的大量制備 單克隆抗體的大量制備重要採用動物體內誘生法和體外培養法。
(1)體內誘生法 取Balb/c小鼠,首先腹腔注射0.5ml液體石蠟或降植烷進行預處理。1-2周後,腹腔內接種雜交瘤細胞。雜交瘤細胞在小鼠腹腔內增殖,並產生和分泌單克隆抗體。約1-2周,可見小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水,即可獲得大量單克隆抗體。
(2)體外培養法 將雜交瘤細胞置於培養瓶中進行培養。在培養過程中,雜交瘤細胞產生並分泌單克隆抗體,收集培養上清液,離心去除細胞及其碎片,即可獲得所需要的單克隆抗體。但這種方法產生的抗體量有限。各種新型培養技術和裝置不斷出現,大大提高了抗體的生產量。
❺ 什麼是單克隆抗體
動物脾臟有上百萬種不同的B淋巴細胞系,具有不同基因的B淋巴細胞合成不同的抗體。當機體受抗原刺激時,抗原分子上的許多決定簇分別激活各個具有不同基因的B細胞。被激活的B細胞分裂增殖形成效應B細胞和記憶B細胞,大量的漿細胞克隆合成和分泌大量的抗體分子分布到血液、體液中。
如果能選出一個製造一種專一抗體的漿細胞進行培養,就可得到由單細胞經分裂增殖而形成細胞群,即單克隆。單克隆細胞將合成針對一種抗原決定簇的抗體,稱為單克隆抗體。
❻ 單克隆抗體是什麼
975年,瑞士科學家喬治•克勒和英國科學家凱撒•米爾斯坦,把產生抗體的B淋巴細胞與多發性骨髓瘤細胞進行融合,形成雜交瘤細胞。這種細胞兼有兩個親代細胞的特徵,既有骨髓瘤細胞無限生長的能力,又有B淋巴細胞產生抗體的功能。因此,這種雜交瘤細胞就能在細胞培養中產生大量單一類型的高純度抗體。這種抗體叫「單克隆抗體」。
把單克隆抗體與抗癌葯物或毒素結合起來,就成為威力強大的抗體「導彈」。把這種抗體「導彈」注射到癌症患者的血液中,它就會發揮導彈一樣的作用,在患者體內追蹤並附著於癌細胞上,然後與抗體結合的抗癌葯物或毒素殺傷和破壞癌細胞,而且很少損傷正常組織細胞。這種抗體「導彈」具有高度選擇性,對癌細胞命中率高,殺傷力強的優點,沒有一般化學葯物那樣不分好壞細胞,格殺勿論的缺點。美國約翰•霍普金斯醫院應用抗體「導彈」治療晚期肝癌病人,收到了驚人的效果。肝臟腫瘤顯著縮小,生存期延長,而且沒有副作用。單克隆抗體技術的發明,是免疫學中的一次革命,打破了過去只能在身體內產生抗體的方法,而成功地在體外用細胞培養的方法產生抗體,同時繁殖快,可以產生在體內達不到的高滴度和高專一性的水平。
❼ 單克隆抗體用途
單克隆抗體問世以來,由於其獨有的特徵已迅速應用於醫學很多領域。主要表現在以下幾個方面。
1.檢驗醫學診斷試劑
作為檢驗醫學實驗室的診斷試劑,單克隆抗體以其特異性強、純度高、均一性好等優點,廣泛應用於酶聯免疫吸附試驗、放射免疫分析、免疫組化和流式細胞儀等技術。並且單克隆抗體的應用,很大程度上促進了商品化試劑盒的發展。
應用單克隆抗體製作的商品化試劑盒廣泛應用於:
①病原微生物抗原、抗體的檢測;
②腫瘤抗原的檢測;
③免疫細胞及其亞群的的檢測;
④激素測定;
⑤細胞因子的測定。
單克隆抗體對抗原的識別,與多克隆抗體有很大的不同。不同試劑盒因使用的單克隆抗體不同,識別抗原的位點不同,導致檢測結果有一定差異。因此,標准化問題還需要進一步研究。
2.蛋白質的提純
單克隆抗體是親和層析中重要的配體。將單克隆抗體吸附在一個惰性的固相基質(如Speharose 2B、4B、6B等)上,並制備成層析柱。當樣品流經層析柱時,待分離的抗原可與固相的單克隆抗體發生特異性結合,其餘成分不能與之結合。將層析柱充分洗脫後,改變洗脫液的離子強度或pH,欲分離的抗原與抗體解離,收集洗脫液便可得到欲純化的抗原。
3. 腫瘤的導向治療和放射免疫顯像技術
將針對某一腫瘤抗原的單克隆抗體與化療葯物或放療物質連接,利用單克隆抗體的導向作用,將葯物或放療物質攜帶至靶器官,直接殺傷靶細胞,稱為腫瘤導向治療。另外,將放射性標記物與單克隆抗體連接,注入患者體內可進行放射免疫顯像,協助腫瘤的診斷。單克隆抗體主要為鼠源性抗體,異種動物血清可引起人體過敏反應。因此,制備人-人單克隆抗體或人源化抗體更為重要,但此方面仍未取得明顯進展。
❽ 單克隆抗體的原理
定義:
由單一雜交瘤細胞克隆分泌的只能識別一種表位(抗原決定簇)的高純度抗體。
原理:
動物脾臟有上百萬種不同的B淋巴細胞系,具有不同基因不同的B淋巴細胞合成不同的抗體。當機體受抗原刺激時,抗原分子上的許多決定簇分別激活各個具有不同基因的B細胞。被激活的B細胞分裂增殖形成效應B細胞(漿細胞)和記憶B細胞,大量的漿細胞克隆合成和分泌大量的抗體分子分布到血液、體液中。
❾ 單克隆抗體的概念
單克隆抗體
單克隆抗體(Monoclonal Antibody,McAb)即單個B淋巴細胞克隆所分泌的抗體。
抗體主要由機體的B淋巴細胞合成,每個B淋巴細胞有合成一種抗體的遺傳基因。當機體受抗原刺激時,抗原分子上的許多決定簇分別激活各個具有不同基因的B細胞。被激活的B細胞分裂增殖形成該細胞的子孫,即克隆。如果選出一個合成一種抗體的細胞進行培養,就可得到由單細胞經分裂增殖而形成細胞群,即單克隆。單克隆細胞所合成的抗體即為單克隆抗體。
1975年Kohler和Milstein首先報道,用細胞雜交技術,使經綿羊紅細胞(SRBC)免疫的小鼠脾細胞,與小鼠骨髓瘤細胞融合,創建了第一個B細胞雜交瘤細胞株,獲得了抗SRBC的單克隆抗體。這是免疫學,乃至醫學史上的一個里程碑。
單克隆抗體的特點是:理化性狀高度均一、生物活性單一、與抗原結合的特異性強、便於人為處理和質量控制,並且來源容易。這些優點使它一問世就受到高度重視,並成為解決生物學和醫學等許多重大問題的重要手段。
❿ 什麼叫單克隆抗體啊
單克隆抗體的基本概念抗體是由B淋巴細胞分化形成的漿細胞合成、分泌的。每一個B淋巴細胞在成熟的過程中通過隨機重排只產生識別一個抗原的抗原受體基因。動物脾臟有上百萬種不同的B淋巴細胞系,重排後具有不同基因不同的B淋巴細胞合成不同的抗體。當機體受抗原刺激時,抗原分子上的許多決定簇分別激活各個具有不同基因的B細胞。被激活的B細胞分裂增殖形成效應B細胞(漿細胞)和記憶B細胞,大量的漿細胞克隆合成和分泌大量的抗體分子分布到血液、體液中。如果能選出一個製造一種專一抗體的漿細胞進行培養,就可得到由單細胞經分裂增殖而形成細胞群,即單克隆。單克隆細胞將合成針對一種抗原決定簇的抗體,稱為單克隆抗體