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DNase

发布时间: 2021-06-29 19:50:28

A. 什么是DNase 超敏感位点

当一个基因处于转录活性状态时,含有这个基因的染色质区域对DNase(一种内切块酶)降解的敏感性要比无转录活性区域高得多。仔细分析具有转录活性基因周围的DNA区域,表明有一个中心区域存在,称为超敏感区域(hypersensitive region)或超敏感位点(hypersensitive site),它对DNaseⅠ是高敏感的。这些位点或区域将首先受到DNaseⅠ的剪切。

B. 核酸酶dnase失活后多久降解

核酸酶有DNase、RNase、核酸酶S1等,可水解相应的DNA和RNA,核酸酶S1可降解单链DNA和RNA,用量增大也可降解双链核酸。它可用于切去ds-cDNA合成中产生的发夹环。
末端转移酶在Mg2+存在下,选择3′-OH端单链DNA为引物加成核苷酸,在Co2+存在下,选择3′-OH端双链DNA为引物加成核苷酸,形成多聚核苷酸尾。常用于核酸末端标记和核酸连接的互补多聚尾(连接器)。

C. dnase i kunitz units是多少克

One Kunitz unit will proce a ΔA260 of 0.001 per min per mL at pH 5.0 at 25 °C, using DNA, Type I or III as substrate. [Mg2+] = 4.2 mM.

D. 生物化学的DNase和RNase分别代表什么

DNA酶和 RNA酶,分别降解DNA和RNA

E. 需要用DNase处理吗

hhjkk

F. 最近买了DNase I 上面的的单位是3000U,但是我的protocol上用的mg/ml,所以谁知道1U DNase相当于多少mg吗

DNase I用时是按照U来实际算的,每个厂家的产品mg里面含有的U都不一样,你的protocol既然是mg/ML的话只能找出protocol使用哪个牌子的酶,然后算出U的量

G. 提取RNA后需要用DNase处理吗如果用的话,怎么处理,会影响RNA的质量吗

如果你RNA提取结束后电泳发现有DNA带,那么你就需要用DNase消化。有市售的RNase free的重组DNase买,按照说明书操作就OK。如果你RNA提取结束后电泳发现没有DNA带,是不需要消化的。当然,如果非常严格的操作要求,即使你电泳看不到DNA带,也要用DNase消化后进行下一步实验。另外,DNase消化是不会影响RNA质量的。

H. 提取RNA后需要用DNase处理吗

如果你RNA提取结束后电泳发现有DNA带,那么你就需要用DNase消化。
如果你RNA提取结束后电泳发现没有DNA带,是不需要消化的.当然,如果非常严格的操作要求,即使你电泳看不到DNA带,也要用DNase消化后进行下一步实验.另外,DNase消化是不会影响RNA质量的.

I. 在提取的RNA中加入DNase后如何灭活DNase

一般两种办法,首先是每50ul体系中加入2ul 0.5M的EDTA然后80度水浴2分钟。另外一种是将50ul体系稀释到100ul然后加入等体积酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)混匀后12000rpm室温离心5min转上清,然后再加入等体积氯仿:异戊醇(24:1),混匀后12000rpm室温离心5min,转上清。在上清中加入10ul 3M的醋酸钠和250ul冷乙醇,-70度放置20min。4度12000rpm离心10min,弃上清。70%冷乙醇洗涤1次,然后干燥。最后沉淀用RNase free 的水溶解。个人建议用第一种方法,第二种方法太耗时间而且RNA回收率也低。

J. 低浓度edta对dnase有抑制吗

一般两种办法,首先是每50ul体系中加入2ul 0.5M的EDTA然后80度水浴2分钟.另外一种是将50ul体系稀释到100ul然后加入等体积酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)混匀后12000rpm室温离心5min转上清,然后再加入等体积氯仿:异戊醇(24:1),混匀后12000rpm室温离心5min,转上清.在上清中加入10ul 3M的醋酸钠和250ul冷乙醇,-70度放置20min.4度12000rpm离心10min,弃上清.70%冷乙醇洗涤1次,然后干燥.最后沉淀用RNase free 的水溶解.个人建议用第一种方法,第二种方法太耗时间而且RNA回收率也低.